طراحی و تولید رده» سلولی بیان کننده ِ ژن‌هایUTR’ 5 و 3NS از عامل اسهال ویروسی گاوها (BVDV) به منظور ارزیابی کارآیی روش‌های درمانی علیه این ویروس
نویسندگان
چکیده مقاله:
زمینه مطالعه: عامل مولد اسهال ویروسی گاو (BVDV) عامل مضرات اقتصادی، بهداشتی قابل توجهی در مزارع پرورش گاو است. به دلیل ناکارآمدی نسبی برنامه‌های ریشه کنی این ویروس، در سال‌های اخیر برای مبارزه با آن تدابیر متعدد ضد ویروسی نظیر ژن درمانی به فراوانی به کار گرفته شده است. یکی از روش‌های ارزیابی کیفیت این تدابیر، استفاده از این ابزارهای ضد ویروسی در رده‌های سلولی اختصاصی بیان کننده آن ژن از طریق القای بیان ژن توسط پلاسمید حامل یا عفونت با وکتورهای ویروسی است. هدف: این مطالعه با هدف تهیه یک رده ی سلولی بسیار بیان کننده بخشی از ژنوم BVDV برای ارزیابی کارآمدی روش‌های درمانی و پیشگیرانه علیه این ویروس انجام شد. روش کار: بدین منظور پس از کشت سویه استاندارد NADL از BVDV و استخراج vRNA، افزوده سازی ژن‌های کد کننده 'UTR5 و 3NS از ژنوم این ویروس و سپس کلونینگ این قـطعـات ژنـی در پلاسمیـد لنتـی ویروسی pWPI- linker B در فرادست ژن GFP انجام شد. پس از تأیید کلونینگ، لنتی وکتورهای حاوی 3BVDV- NS و 'UTR5 BVDV- در سلول‌های T293 با استفاده از سیستم packaging نسل سوم تولید شدند. در مرحله بعد سلول‌های MDBK بیان کننده دائمی 'UTR5 و 3NS با استفاده از عفونت با لنتی ویروس‌های بیان کننده 3BVDV- NS و 'UTR5 BVDV- تولید گردیدند. نتایج: کارآمدی عفونت با لنتی وکتورهای حامل ترانس ژن با آزمون‌های مشاهده مستقیم با میکروسکوپ فلورسنت، وسترن بلاتینگ و RT-PCR بررسی و با گروه کنترل مقایسه گردید و حضور و بیان ژن‌های مورد نظر تأیید شد. نتیجه‌گیری‌نهایی: نتایج نشان دهنده تولید موفقیت آمیز رده ی سلولی MDBK بسیار بیان کننده این دو ژن از BVDV بود و لنتی وکتورها به دلیل بیان طولانی مدت و پایدار ژن تا چندین نسل سلولی و امکان عفونی نمودن بسیاری از رده‌های سلولی نسبت به سایر وکتورهای ویروسی ارجحیت دارند.
منابع مشابه
طراحی و تولید رده» سلولی بیان کننده ِ ژن های utr’ 5 و 3ns از عامل اسهال ویروسی گاوها (bvdv) به منظور ارزیابی کارآیی روش های درمانی علیه این ویروس
زمینه مطالعه: عامل مولد اسهال ویروسی گاو (bvdv) عامل مضرات اقتصادی، بهداشتی قابل توجهی در مزارع پرورش گاو است. به دلیل ناکارآمدی نسبی برنامه های ریشه کنی این ویروس، در سال های اخیر برای مبارزه با آن تدابیر متعدد ضد ویروسی نظیر ژن درمانی به فراوانی به کار گرفته شده است. یکی از روش های ارزیابی کیفیت این تدابیر، استفاده از این ابزارهای ضد ویروسی در رده های سلولی اختصاصی بیان کننده آن ژن از طریق ا...
متن کاملشیوع سرمی آلودگی به ویروس اسهال ویروسی گاو (BVDV) در گوسفندان استان خوزستان
این مطالعهی سرولوژیکی به منظور تعیین فراوانی آلودگی گوسفندان استان خوزستان به ویروس اسهال ویروسی گاو (BVDV) صورت گرفت. بدین منظور نمونهی خون از 318 رأس گوسفند متعلق به 5 شهر اهواز اخذ گردید. گوسفندان به 2 گروه ماده و نر و 4 گروه سنی 1، 2، 3 و 4≤ سال تقسیم شدند. از آزمون خنثیسازی سرم و با استفاده از ویروس NADL، سویهی سیتوپاتیک و ژنوتیپ BVDV-1 برای جستجوی پادتن ضد ویروس BVDV استفاده شد...
متن کاملتولید رده سلولی K562 بیان کننده اندونوکلئاز Cas9 (CRISPR-associated9)
چکیده سابقه و هدف امروزه ژنوم رده‌های سلولی به منظور ایجاد مدل‌های بیماری و درمان آن‌ها ویرایش می‌شود. البته بزرگی ژن Cas9 موجب مشکلاتی از جمله پایین بودن کارآیی سیستم CRISPR شده است. برای حل این مشکل، رده‌های سلولی بیان‌کننده Cas9 تولید شده‌اند که در آن‌ها تنها باید بخش RNA راهنمای CRISPR به سلول ترانسفکت شود. مواد و روش‌ها در این مطالعه تجربی، قطعه PGK-PURO/CMV (PPC) با PCR از وکتور pAAVS1-p...
متن کاملخالصسازی ویروس هرپس‌سیمپلکس تیپ یک به منظور تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال با تیتر بالا علیه این ویروس
چکیده: مقدمه و هدف: عفونت‌های ویروس هرپس‌سیمپلکس تیپ یک از شایع‌ترین عفونت‌های ویروسی در سراسر جهان است که روش‌های مختلف تشخیصی، پیشگیری و درمان آن در حال بررسی است. هدف از این مطالعه تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال با عیار بالا، علیه این ویروس به منظور استفاده از آن در بهینه‌سازی تست‌های تشخیصی و تحقیقاتی در داخل کشور بود. مواد و روش‌ها : این پژوهش تجربی طی سال‌های 1381 ـ 1380 در گروه ویروس...
متن کاملبیان ژن کد کننده پروتئین E2 ویروس اسهال ویروسی گاو در E.coli
اسهال ویروسی گاو (Bovine Viral Diarrhea) یکی از بیماری‌های ویروسی بسیار مهم این حیوان است که به وسیله‌ی یک پستی ویروس (BVDV) از خانواده‌ی فلاوی ویریده، ایجاد می‌شود. BVDV با تأثیرگذاری بر روند تولید مثل نیز خسارت‌های بسیاری را موجب می‌شود. پروتئین E2 مهم‌ترین پروتئین ساختمانی این ویروس در القای پاسخ ایمنی محافظت کننده است. هدف از این پژوهش، کلونینگ و بیان ژن پروتئین E2 در باکتری E. c...
متن کاملThe effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2
كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 69 شماره 4
صفحات 311- 323
تاریخ انتشار 2014-12-22
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023